1、传代培养保藏法:包括又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等,低温生物菌种多少钱,培养后于4-6℃冰箱内保存。
2、液体石蜡覆盖保藏法:液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间。
3、载体保藏法:载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法。
4、寄主保藏法:寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物。
5、冷冻干燥保藏法:先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥),其中真空冷冻干燥法常见。
退化(degeneration):菌种在培养或保藏过程中,由于自发突变的存在,出现某 些原有优良生产性状的劣化、遗传标记的丢失等现象,称为菌种的退化。菌种退化不是突然发生的,而是从量变到---的逐步演变过程。开始时,在群体细胞中仅有个别细胞发生自发突变(一般均为负变),低温生物菌种,不会使群体菌株性能发生改变。经过连续传代,群体中的负变个体达到一定数量,发展成为优势群体,从而使整个群体表现为---的退。经分析发现,导致这一现象的原因有以下几方面。
1. 基因突变:1.有关基因发生负突变导致菌种退化 菌种退化的主要原因是有关基因的负突变。如果控制产量的基因发生负突变,则表现为产量下降;如果控制孢子生成的基因发生负突变,低温生物菌种报价,则产生孢子的能力下降。菌种在移种传代过程中会发生自发突变。虽然自发突变的几率很低(一般为10-6~10-9),尤其是对于某一特定基因来说,突变频率---。但是由于微生物具有---的代谢繁殖能力,随着传代次数增加,退细胞的数目就会不断增加,在数量上逐渐---势,成为一株退化了的菌株。
2.表型---造成菌种退化 表型---现象也会造成菌种退化。如,在诱变育种过程中,经常会发现某菌株初筛时产量较高,进行复筛时产量却下降了。
将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。放线孢子的培养基大多是采用麸皮或豌豆浸出液、---及无机盐与琼脂制成的。将斜面孢子接入扩大的扁瓶孢子培养基中,于28~37℃培养5~14天。所获得的大量孢子可直接作为种子罐 (6)的种子。如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶(5)液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如---)和氮源(如玉米浆等),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐(7)的种子应是生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
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