低温生物菌种公司-低温生物菌种-北京开碧源有限公司

低温生物菌种的孢子分离法

( 1 )褶上涂抹法:选取新鲜、健壮、未开伞、的子实体，洗净后用0 75 %酒精表面灭菌2 分钟，低温生物菌种，然后连同培养基一起放入接种箱内，经马林熏蒸消毒12 ~ 24 小时，再按无菌操作技术将接种环在子实体菌褶上涂抹，把涂抹后带孢子的接种环在培养基上划线接种，然后置于25 ~ 28 ℃恒温箱内培养，可得纯菌种。

( 2 )孢子印采集法:取灭过菌的载玻片、试纸或黑布，置于新鲜、未开伞或未开裂的子体菌褶的下方。经24 小时后，便落下孢子，形成印痕(即孢子印)。然后，用接种环或玻璃棒蘸取孢子，接种在平面或斜面培养基上，进行恒温培养，可得纯菌种。

( 3 )孢子收集器采集法:孢子收集器由玻璃钟罩、培养皿、三角架、搪瓷盘等组成。钟罩下为一搪瓷盘，直径25 厘米左右，盘内先垫衬4~6 层纱布，中央放1 副9 厘米直径的培养皿，大盖口朝下，上放小的，口向上。然后，在上面小的培养皿上放1 只铅丝绕成的三角架，再将带孔的玻璃钟罩盖上，顶上罩孔用棉塞塞好，用纱布包好整个孢子收集器，置于高压灭菌锅或蒸笼内灭菌2小时。

低温生物菌种知多少？

实验室菌种的传代保藏过程

1. 按菌种说明书要求复溶菌粉，转种于适当的增菌培养基内（g1），复壮后转接至平板上，并于适当温度下培养适当时间，分离出单个纯种菌落，此为第2代（g2）。

2. 菌种鉴定完成后，挑取纯菌落制成浓菌悬液用于制备甘油冷冻管，同时挑取纯菌落转接斜面菌种作为工作用菌种。此时，保藏菌种为第2代，但工作用菌种则为第三代。

3. 将第2代菌种管冷冻保存，将工作用菌种于适当温度下培养适当时间后可用于试验。

4. 取一支冷冻保存的g2代菌种转种于平板和斜面培养基上，平板上的菌种制成冷冻保藏管第三代（g3），斜面培养基经适当温度下培养适当时间后用作工作用菌种（w3）。

5. 将第三代菌种（g3）冷冻或低温保存，低温生物菌种多少钱，将生长、转种后的g2菌种经灭菌处理后丢弃。

6. 当工作用菌种代数小于5时，可直接用上一代工作用菌种转接下一代工作用菌种，如w3可直接转接为w4。

7. 按上述程序操作，直至g4转为w5为止，需重新开启安瓿，再重复上述操作程序、保藏和使用菌种。

以上方法中，菌种被分为两类。传代用菌种和工作用菌种，传代用菌种用于甘油冷冻管法保藏，工作用菌种用斜面低温保藏法保藏。

实验证明，甘油冷冻管的有效期至少为2年，但其主要适用于---（需氧）、酵母菌的传代、保藏、---和芽孢类---则需应用其它方法。