筛选:工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛,挑选具有某种能力的有用菌种。
分离:首先是从土壤或腐生植物中收集含菌样品,用无菌水稀释后,涂布于置有适宜---、霉菌生长的琼脂培养基平皿上,并将其倒置于恒温箱中,培养一定时间,低温生物菌种,平皿上长出的许多单个菌落(单一微生物的集落)经分别分离后即为各种纯种菌株,简称纯种,移种至试管斜面培养基上,置4℃冰箱备用。
筛选模型:根据不同的筛选目的,采用不同的筛选模型。如常规筛选菌种的方法是将土壤中分离所得的纯种,在含有琼脂培养基的平皿上培养后,用打孔器将菌块移至含有试验菌的琼脂培养基上,在适宜的温度下培养一定时间后取出,如在菌块的周围有透明的---圈,则表明此菌种具有产生抑制试验菌生长的菌种物质的能力。所得菌种经过摇瓶液体发酵,测定发酵液或菌丝体内菌种的含量,选出生产能力高的菌种。另一方面对所提取的菌种进行结构分析、药理试验及---试验等,确为有效者,即可作为生产菌种。又如筛选脂肪酶生产菌种的方法是将分离所得的霉菌涂布于含有牛脂的琼脂培养基上,恒温培养一定时间,低温生物菌种,如菌落周围出现透明圈的,则该菌具有分解脂肪的能力,进一步作摇瓶发酵测定酶活力,挑选产量高者作生产菌种的出发菌株。
此方法是很常用的,广泛适用于---、酵母菌和霉菌等大多数微生物菌种的短期保藏及不宜用冷冻干燥保藏的菌种。
此方法的缺点是菌株仍有一定程度的代谢活动能力,保藏期短,传代次数多,低温生物菌种厂家,菌种较容易发生变异和被污染。
正常情况下的保菌期:霉菌和有芽孢的---一般可保存6个月左右,无芽孢的---可保存1个月左右,酵母菌可保存3个月左右。
生物有机肥产品生产菌种使用现状
---类生产用菌种除常见的芽孢外, 还出现了高地芽孢菌、 类干酪乳菌、 屎肠球菌、 盐居固氮菌等新菌种, 其中, 高地芽孢菌和盐居固氮菌普遍存在于土壤环境中, 未见致病性---, 属风险一级; 类干酪乳菌又名为副干酪乳菌, 虽为风险一级 , 但有从动物---部位分离到该菌的---;屎肠球菌属于乳酸菌类,属风险二级, 建议谨慎使用。伯克霍尔德氏菌是一些具有生物---、 促进植物生长和生物修复等功能的---, 但同时也是可以引起鼻疽、 类鼻疽病的致病菌,低温生物菌种多少钱, 因此---伯克霍尔德氏菌属于风险三级, 需做致病性试验, 建议慎用或不用。---类生产用菌株主要为丝状---和酵母菌。哈茨木霉、 米曲霉、 淡紫紫孢菌、 长枝木霉、 绿色木霉、 棘孢木霉、 黑曲霉、 粉红螺旋聚孢霉、 金龟子绿僵菌等属于生物安全风险等级二级, 需按照ny/t 1109-2017 <微生物肥料生物安全通用技术准则> 进行毒理学测试。酵母菌主要以酿酒酵母为主, 还有少量东方伊萨酵母、杰丁塞伯林德纳氏酵母 (原产朊假丝酵母、 杰丁毕赤酵母)、 膜醭毕赤酵母、 解脂耶罗威亚酵母等, 属于生物安全风险等级一级, 可免做毒理学试验。
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