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低温生物菌种的保存方法有哪些？

（一）培养基保存法

利用各种斜面和半固体培养基，加上石蜡油保存菌种，是一种简易的保存方法。

1.普通琼脂斜面保存法：肠道菌、等一般---可接种于不含糖的普通琼脂斜面上，斜面底部应加少许无糖肉膏汤，以防干涸。经35℃培养18～24h后，移种于4℃冰箱中，低温生物菌种价格，一般可保存一个月，每月传代一次。

2.---琼脂斜面保存法：链球菌、应接种于---琼脂斜面上，35℃培养生长后，置4℃冰箱中保存，链球菌须半个月至1个月移种一次，新分离菌株须2～4天移种一次，低温生物菌种公司，以后逐渐延长移种时间，在适应后可延至半个月移种一次。

3.巧克力色斜面保存法：宜保存菌，并在35℃孵箱中保存，一般每2天移种一次。

4.鸡蛋斜面保存法：适于保存含有vi抗原的沙门菌属及其他含表面抗原的---，一般可保存一个月。

5.半固体穿刺保存法：将---接种于琼脂半固体或琼脂半固体内，经35℃培养18～24h，再以无菌方法加入灭菌的液体石蜡。高度约lcm，置4℃冰箱保存。保存时间可达3～6个月。

（二）干燥保存法

原理是将---体内的水分蒸发掉，使其处于休眠和代谢停滞状态，低温生物菌种，从而达到长期保存菌种的目的医|学教|育网搜集整理。菌种干燥后低温保存，可保存数年至十几年。

（三）冷冻干燥保存法

本法又称冷冻真空干燥法。它综合利用了各种有利于菌种保存的因素（低温、干燥和缺氧等），是目前有效的菌种保存方法之一。用本法保存的菌种具有成活率高，变---小等优点，保存期一般3～5年，有的可长达10年以上。

（四）脱脂牛奶保存法

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实验室菌种的传代保藏过程

1. 按菌种说明书要求复溶菌粉，转种于适当的增菌培养基内（g1），复壮后转接至平板上，并于适当温度下培养适当时间，分离出单个纯种菌落，此为第2代（g2）。

2. 菌种鉴定完成后，挑取纯菌落制成浓菌悬液用于制备甘油冷冻管，同时挑取纯菌落转接斜面菌种作为工作用菌种。此时，保藏菌种为第2代，但工作用菌种则为第三代。

3. 将第2代菌种管冷冻保存，将工作用菌种于适当温度下培养适当时间后可用于试验。

4. 取一支冷冻保存的g2代菌种转种于平板和斜面培养基上，平板上的菌种制成冷冻保藏管第三代（g3），斜面培养基经适当温度下培养适当时间后用作工作用菌种（w3）。

5. 将第三代菌种（g3）冷冻或低温保存，将生长、转种后的g2菌种经灭菌处理后丢弃。

6. 当工作用菌种代数小于5时，可直接用上一代工作用菌种转接下一代工作用菌种，如w3可直接转接为w4。

7. 按上述程序操作，直至g4转为w5为止，需重新开启安瓿，再重复上述操作程序、保藏和使用菌种。

以上方法中，菌种被分为两类。传代用菌种和工作用菌种，传代用菌种用于甘油冷冻管法保藏，低温生物菌种报价，工作用菌种用斜面低温保藏法保藏。

实验证明，甘油冷冻管的有效期至少为2年，但其主要适用于---（需氧）、酵母菌的传代、保藏、---和芽孢类---则需应用其它方法。