1、倾注平板法
首先把微生物悬液通过一系列稀释,取一定量的稀释液与熔化好的保持在40~50°左右的营养琼脂培养基充分混合,然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中,低温生物菌种价格,待凝固之后,把这平板倒置在恒箱中培养。单一细胞经过多次增殖后形成一个菌落,取单个菌落制成悬液,重复上述步骤数次,便可得到纯培养物 2、涂布平板法
首先把微生物悬液通过适当的稀释,取一定量的稀释液放在无菌的已经凝固的营养琼脂平板上,然后用无菌的玻璃刀把稀释液均匀地涂布在培养基表面上,经恒温培养便可以得到单个菌落。3、平板划线法
简单的分离微生物的方法是平板划线法。用无菌的接种环取培养物少许在平板上进行划线。划线的方法很多,常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、四格法等。当接种环在培养基表面上往后移动时,接种环上的菌液逐渐稀释,低温生物菌种,然后在所划的线---散着单个细胞,经培养,每一个细胞长成一个菌落。
2、富集培养法
富集培养法的方法和原理非常简单。我们可以创造一些条件只让所需的微生物生长,在这些条件下,所需要的微生物能有效地与其他微生物进行竞争,在生长能力方面远---过其他微生物。所创造的条件包括选择合适的碳源、能源、温度、光、ph、渗透压和氢受体等。在相同的培养基和培养条件下,经过多次重复移种,然后富集的菌株很容易在固体培养基上长出单菌落。如果要分离一些专性寄生菌,就必须把样品接种到相应敏感宿主细胞群体中,使其大量生长。通过多次重复移种便可以得到纯的寄生菌。
流程
4.1 优良糖化酶菌株的分离与筛选
融化培养基***倒平板***打散孢子团粒***梯度稀释***涂布平板***培养观察***滴加碘液***挑菌落***接种***培养***糖化酶活力测定***菌种保存
4.2 酸乳制品中的乳酸菌的分离
制培养基***倒平板***梯度稀释***涂布平板***培养观察***挑菌落***接牛乳管***培养观察***传代培养***挑选凝乳管***乳酸测定***菌种保存
5 步骤
优良糖化酶菌株的分离与筛选
(1)融化淀粉察氏培养基,稍冷后倒平板与斜面数个。
(2)取种曲少许,低温生物菌种,加入10ml带玻璃球的无菌生理盐水的三角瓶中,用力振荡打散孢子团粒,使之形成均匀的孢子悬浮粒。然后将其用无菌纱布过滤于无菌试管中。
(3)将上述滤液以10倍稀释法知释至10-7,取后3个稀释度的稀释液各0.2ml,于淀粉察氏培养基平板上用无菌涂布器分别依次涂布2至3个皿,30℃培养1~2d。
(5)性能测定:测定各菌落的糖化酶活力。
(1)选择培养成熟的(一般指孢子层生长---的,营养细胞用此法效果不好)优良菌种,以无菌水洗下,制成孢子悬液。
(2)于每支沙土管中加入约0.5ml(一般以---使沙土润湿为宜)孢子悬液,以接种针拌匀。
(3)放入真空干燥器内,用真空泵抽干水分,抽干时间越短越好,务使在12小时内抽干。
(4)每10支抽取一支,用接种环取出少数沙粒,接种于斜面培养基上,进行培养,观察生长情况和有无杂菌生长,如出现杂菌或菌落数很少或---不长,则说明制作的沙土管有问题,尚须进一步抽样检查。
(5)若经检查没有问题,用火焰熔封管口,低温生物菌种厂家,放冰箱或室内干燥处保存。每半---查一次活力和杂菌情况。
(6)需要使用菌种,---培养时,取沙土少许移入液体培养基内,置温箱中培养。
此法多用于能产生孢子的微生物如霉菌、,因此在工业生产中应用广,效果亦好,可保存2年左右,但应用于营养细胞效果不佳。
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