(1)准备安瓿管用于液氮保藏的安瓿管，要求---受温度突然变化而不致破碎，低温生物菌种，因此，需要采用硼硅酸盐玻璃制造的安瓿管，安瓿管的大小通常使用75×10mm的，或能容1.2mm液体的。
(2)加保护剂与灭菌保存---、酵母菌或霉菌孢子等容易分散的细胞时，则将空安瓿管塞上棉塞，1.05kg/cm2，121.3℃灭菌15分钟:若作保存霉菌菌丝体用则需在安瓿管内预先加入保护剂如10%的甘油蒸馏水溶液或10%二甲---蒸馏水溶液，加入量以能浸没以后加入的菌落圆块为限，而后再用1.05kg/cm2>;，121.3℃灭菌15分钟。
(3)接入菌种将菌种用10%的甘油蒸馏水溶液制成菌悬液，装入已灭菌的安瓿管;霉菌菌丝体则可用灭菌打孔器，从平板内切取菌落圆块，放入含有保护剂的安瓿管内，然后用火焰熔封。浸入水中检查有无漏洞。
(4)---再将已封口的安瓿管以每分钟下降1℃的慢速---至-30℃。若细胞急剧冷冻，则在细胞内会形成冰的结晶，因而降低存活率。
(5)保藏经---至-30℃的安瓿管立即放入液氮冷冻保藏器(图ⅶ-14)的小圆筒内，然后再将小圆筒放入液氮保藏器内。液氮保藏器内的气相为-150℃，液态氮内为-196℃。
(6)恢复培养保藏的菌种需要用时，将安瓿管取出，立即放入38-40℃的水浴中进行急剧解冻，直到全部融化为止。再打开安瓿管，将内容物移入适宜的培养基上培养。
此法除适宜于一般微生物的保藏外，对一些用冷冻干燥法都难以保存的微生物如支原体、衣原体、氢---、难以形成孢子的霉菌、噬菌体及动物细胞均可长期保藏，而且性状不变异。缺点是需要特殊设备。
普通硝化---在温度低于15°c时，活性大幅度降低，硝化速度也明显下降，温度低于5°c时，普通硝化---的生命活动几乎停止，处于休眠状态，普通中温微生物适合生长温度为25~37℃，目前污水处理厂的处理工艺大都可实现15°c左右氨氮达标排放，当温度低于12°c时，低温生物菌种报价，中温菌的活性---降低，甚至没有繁殖功能，使得污水厂cod、氨氮和磷处理效果变差，出水无法达标排放，投加cod去除剂，氨氮去除剂，低温生物菌种多少钱，除磷剂等化学絮凝剂或氧化剂，在增加污水厂运营成本的同时，又形成了二次污染。
1 沙土管制备
将河沙用60目过筛，弃去大颗粒及杂质，再用80目过筛，去掉细沙。用吸铁石吸去铁质，放入容器中用10%---浸泡，如河沙中有机物较多可用20%---浸泡。24小时后倒去---，用水洗泡数次至中性，将沙子烘干或晒干。另取地面下40～60cm非耕作层贫瘠且粘性较小的土，研碎，100目过筛，水洗至中性，烘干。将处理后的沙、土按比2∶1混合。混匀的沙土分装入安瓿管或小试管中，高度为1cm左右，塞好棉塞，121℃湿热灭菌30min。随机抽取灭菌后的砂土管若干支，无菌条件下取少许砂土至营养肉汁培养基中，30℃培养24小时，检查无微生物生长后方可使用。
2 斜面培养物的制备
参照定期移植法。
3 制备菌悬液
向培养好的斜面培养物中注入3～5ml无菌水，低温生物菌种价格，洗下细胞或孢子制成菌悬液。用无菌吸管吸取菌悬液，均匀滴入沙土管中，每管0.2～0.5ml。霉菌可直接挑取孢子拌入沙土管中。
4 干燥
真空抽去沙土管中水分。
5 保藏
将沙土管用火焰熔封后存放于低温(4～6℃)干燥处保藏，每隔半---查一次菌种存活性及纯度。或将沙土管直接用牛皮纸或塑料纸包好，置干燥器内保存。
保藏时间2～10年。
6 恢复培养
无菌条件下打开沙土管，取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上，长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中，增殖培养后再转接斜面。
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