研究在低温条件下生命活动的生物化学规律的新兴学科,是低温生物学的重要基础。例如,在某些冬眠状态的昆虫---中,甘油含量可---25%,以致在-35℃的状况下也不会冰冻。另一方面,利用低温下变化减慢,低温生物菌种,来研究在常温下变化较快的一些生物化学反应。如在酶的催化、蛋白质和---在溶液中的空间构象变化中。某些中间变化常温下在千分之一秒的时间内即可完成,用一般方法难以探讨,而在含有添加剂使温度降至-40℃左右的溶液中,反应速度大为减慢就可用常规方法进行研究。
菌种的复壮(rejuvenation):使衰的菌种恢复原来优良性状。
狭义的复壮是指在菌种已发生衰的情况下,通过纯种分离和生产性能测定等方法,从衰的群体中找出未衰的个体,以达到恢复该菌原有典型性状的措施;
广义的复壮是指在菌种的生产性能未衰前就有意识的经常、进行纯种的分离和生产性能测定工作,以期菌种的生产性能逐步提高。实际上是利用自发突变(正变)不断地从生产中选种。
实验室菌种的传代保藏过程
1. 按菌种说明书要求复溶菌粉,转种于适当的增菌培养基内(g1),复壮后转接至平板上,并于适当温度下培养适当时间,分离出单个纯种菌落,此为第2代(g2)。
2. 菌种鉴定完成后,低温生物菌种报价,挑取纯菌落制成浓菌悬液用于制备甘油冷冻管,同时挑取纯菌落转接斜面菌种作为工作用菌种。此时,保藏菌种为第2代,但工作用菌种则为第三代。
3. 将第2代菌种管冷冻保存,低温生物菌种,将工作用菌种于适当温度下培养适当时间后可用于试验。
4. 取一支冷冻保存的g2代菌种转种于平板和斜面培养基上,平板上的菌种制成冷冻保藏管第三代(g3),斜面培养基经适当温度下培养适当时间后用作工作用菌种(w3)。
5. 将第三代菌种(g3)冷冻或低温保存,低温生物菌种价格,将生长、转种后的g2菌种经灭菌处理后丢弃。
6. 当工作用菌种代数小于5时,可直接用上一代工作用菌种转接下一代工作用菌种,如w3可直接转接为w4。
7. 按上述程序操作,直至g4转为w5为止,需重新开启安瓿,再重复上述操作程序、保藏和使用菌种。
以上方法中,菌种被分为两类。传代用菌种和工作用菌种,传代用菌种用于甘油冷冻管法保藏,工作用菌种用斜面低温保藏法保藏。
实验证明,甘油冷冻管的有效期至少为2年,但其主要适用于---(需氧)、酵母菌的传代、保藏、---和芽孢类---则需应用其它方法。
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