( 1 )褶上涂抹法:选取新鲜、健壮、未开伞、的子实体,洗净后用0 75 %酒精表面灭菌2 分钟,然后连同培养基一起放入接种箱内,经马林熏蒸消毒12 ~ 24 小时,再按无菌操作技术将接种环在子实体菌褶上涂抹,把涂抹后带孢子的接种环在培养基上划线接种,然后置于25 ~ 28 ℃恒温箱内培养,可得纯菌种。
( 2 )孢子印采集法:取灭过菌的载玻片、试纸或黑布,低温生物菌种,置于新鲜、未开伞或未开裂的子体菌褶的下方。经24 小时后,便落下孢子,低温生物菌种公司,形成印痕(即孢子印)。然后,用接种环或玻璃棒蘸取孢子,接种在平面或斜面培养基上,进行恒温培养,可得纯菌种。
( 3 )孢子收集器采集法:孢子收集器由玻璃钟罩、培养皿、三角架、搪瓷盘等组成。钟罩下为一搪瓷盘,直径25 厘米左右,盘内先垫衬4~6 层纱布,中央放1 副9 厘米直径的培养皿,大盖口朝下,上放小的,口向上。然后,低温生物菌种报价,在上面小的培养皿上放1 只铅丝绕成的三角架,再将带孔的玻璃钟罩盖上,顶上罩孔用棉塞塞好,低温生物菌种,用纱布包好整个孢子收集器,置于高压灭菌锅或蒸笼内灭菌2小时。
1、安瓿管或冻存管的准备
预冻时一般冷冻速度控制在以每分钟下降1℃为好、使样品---到-35℃。
1、传代培养保藏法:包括又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等,培养后于4-6℃冰箱内保存。
2、液体石蜡覆盖保藏法:液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间。
3、载体保藏法:载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法。
4、寄主保藏法:寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物。
5、冷冻干燥保藏法:先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥),其中真空冷冻干燥法常见。
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