1.冷冻真空干燥法。将已培养、生长丰富的菌体或孢子悬浮于灭菌的、卵白、脱脂奶制成菌悬液,将悬液以无菌操作分装于灭菌的玻璃安瓿瓶中,低温生物菌种多少钱,每管约0.3-0.5毫升,然后用耐压橡皮管与冷冻干燥装置连接,安瓿瓶放在冷冻槽中于-30℃至-40℃迅速冷冻,并在冷冻状态下抽空干燥,并在真空状态下熔封安瓿,在-20℃保存,一般可保存十年以上,低温生物菌种,但成本较高。
2.液氮---温保藏法。首先将要保藏的菌种制成菌悬液备用;其次,准备安瓿瓶,每瓶加入0.8毫升冷冻保护剂10%(体积比)甘油蒸馏水溶液,塞棉塞灭菌(1公斤/平方厘米,5分钟)。无菌检查后,接入要保藏的菌种,火焰熔封瓶口,检查是否漏气,将封好口的安瓿瓶放在---器内,以每分钟下降1℃的速度缓慢降温,使保藏品逐步均匀地---,直至-35℃,以后---速度就不需控制,安瓿---后立即放入液氮罐内,在-150至-196℃保藏,低温生物菌种厂家,该法只有少数科研院所使用。
先将所需的种------采集回来,选取新鲜、个体大、壮实、中龄及无病虫害的子实体(或菌核、菌索),作为分离用的材料。若为子实体,取其菌盖或菌柄组织;若为菌核,取其全部或部分(如茯苓)菌核;若为菌索,取其部分根状菌索(如蜜环菌)。再用0.1 %或75 %酒精进行表面消毒2 分钟,用无菌水(或冷开水)冲洗数次,洗净残留的药液后切成小块。,然后,放入pda 培养基的试管或培养皿上,置24 ~26℃温度下,培养5 ~ 7 天。在分离的---组织周围见长有白色菌丝时,应及时将菌丝移至斜面试管培养基上,再置温度24 ~26 ℃下培养7~10 天,即得纯菌种。所得的纯菌种还可继续扩大培养或保藏。
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