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  低温生物菌种对沙土有什么要求？

1 沙土管制备
将河沙用60目过筛，弃去大颗粒及杂质，再用80目过筛，低温生物菌种公司，去掉细沙。用吸铁石吸去铁质，低温生物菌种报价，放入容器中用10%---浸泡，如河沙中有机物较多可用20%---浸泡。24小时后倒去---，用水洗泡数次至中性，将沙子烘干或晒干。另取地面下40～60cm非耕作层贫瘠且粘性较小的土，研碎，100目过筛，水洗至中性，烘干。将处理后的沙、土按比2∶1混合。混匀的沙土分装入安瓿管或小试管中，高度为1cm左右，塞好棉塞，121℃湿热灭菌30min。随机抽取灭菌后的砂土管若干支，无菌条件下取少许砂土至营养肉汁培养基中，30℃培养24小时，检查无微生物生长后方可使用。
   2 斜面培养物的制备
参照定期移植法。
   3 制备菌悬液
  向培养好的斜面培养物中注入3～5ml无菌水，低温生物菌种多少钱，洗下细胞或孢子制成菌悬液。用无菌吸管吸取菌悬液，均匀滴入沙土管中，每管0.2～0.5ml。霉菌可直接挑取孢子拌入沙土管中。
4 干燥
真空抽去沙土管中水分。
5 保藏
将沙土管用火焰熔封后存放于低温(4～6℃)干燥处保藏，每隔半---查一次菌种存活性及纯度。或将沙土管直接用牛皮纸或塑料纸包好，置干燥器内保存。
保藏时间2～10年。
  6 恢复培养
  无菌条件下打开沙土管，取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上，长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中，增殖培养后再转接斜面。

低温生物菌种的影响因素有哪些

菌的：保藏的菌种应培养在营养丰富的条件下，使之进入稳定期，稍老一些的菌体对环境抵抗力强。另处，作为冷冻干燥的菌悬液细胞浓度要高不同的菌对冷冻干燥的耐受程度不同，如果保存的菌液细胞浓度不高，就会使以后传种造成困难，保存期也会受到影响。

保护剂：不同种类的保护剂对不同微生物的作用是不同的，低温生物菌种，如个别菌种在脱脂乳作保护剂的情况下失败率---99.99%，而采用葡聚糖等混和保护剂时失败率---减少。一般情况下，那些容易保存的菌种对保护剂的要求不很严格，而不易保存的菌种对保护剂的要求却很苛刻。因此，选择好的保护剂是冷冻干燥保存菌种的关键因素。

干燥速度：实验表明，慢速干燥比快速干燥存活率高，如青霉菌6h干燥存活率为67.3%，而3h为59%。

空气的影响：冷冻干燥后空气对---细胞影响较大，可导致细胞损伤进而失败，故在冻干后应立即在真空下融封，才有利于长期保存。

温度的影响：在干燥和真空状况下温度的影响远没有上述几项因素重要，因此可以在室温下保存，但许多微生物在4℃保存的存活率要比在室温下高1倍。

含水量的影响：水分含量过高对菌存活不利，完全脱水也不利于保存，一般把干燥后的细胞含水量控制在3%以下(1%-3%)