将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,低温生物菌种,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。放线孢子的培养基大多是采用麸皮或豌豆浸出液、---及无机盐与琼脂制成的。将斜面孢子接入扩大的扁瓶孢子培养基中,于28~37℃培养5~14天。所获得的大量孢子可直接作为种子罐 (6)的种子。如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶(5)液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如---)和氮源(如玉米浆等),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐(7)的种子应是生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
保藏可按微生物各分支学科的性质分为普通﹑工业﹑农业﹑医学﹑兽医﹑等保藏管理中心。此外﹐也可按微生物类群进行分工﹐如沙门氏菌﹑弧菌﹑根瘤菌﹑乳酸菌﹑酵母菌﹑丝状---﹑藻类等保藏中心。
上约有 550个菌种保藏机构。其中有美国典型菌种保藏中心(简称---c﹐马里兰)﹕1925年建立﹐是上大的﹑保存微生物种类和数量多的机构﹐保存---﹑衣原体﹑---﹑酵母菌﹑---﹑藻类﹑原生动物等约 29000株﹐都是典型株﹔荷兰---菌种保藏中心(简称cbs﹐得福特):1904年建立﹐保存酵母菌﹑丝状---约 8400种﹑18000株﹐大多是模式株﹔英国全国菌种保藏中心(简称nctc﹐伦敦)﹕保存兽用病原微生物约2740株﹔英联邦---研究所(简称cmi﹐萨里郡)﹕保存---模式株﹑生理生化和有机合成等菌种2763种﹐8000株﹔日本大阪发酵研究所(简称ifo﹐大阪):保存普通和工业微生物菌种约9000株﹔美国相关部北方利用研究开发部(北方地区研究室﹐简称nrrl﹐伊利诺伊州皮契里亚)﹕收藏农业﹑工业﹑微生物分类学所涉及的菌种﹐包括---5000株﹐丝状---1700株﹑酵母菌6000。
先将所需的种------采集回来,选取新鲜、个体大、壮实、中龄及无病虫害的子实体(或菌核、菌索),作为分离用的材料。若为子实体,取其菌盖或菌柄组织;若为菌核,取其全部或部分(如茯苓)菌核;若为菌索,取其部分根状菌索(如蜜环菌)。再用0.1 %或75 %酒精进行表面消毒2 分钟,用无菌水(或冷开水)冲洗数次,低温生物菌种,洗净残留的药液后切成小块。,然后,放入pda 培养基的试管或培养皿上,置24 ~26℃温度下,低温生物菌种公司,培养5 ~ 7 天。在分离的---组织周围见长有白色菌丝时,应及时将菌丝移至斜面试管培养基上,再置温度24 ~26 ℃下培养7~10 天,即得纯菌种。所得的纯菌种还可继续扩大培养或保藏。
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