筛选:工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛,挑选具有某种能力的有用菌种。
分离:首先是从土壤或腐生植物中收集含菌样品,用无菌水稀释后,低温生物菌种公司,涂布于置有适宜---、霉菌生长的琼脂培养基平皿上,并将其倒置于恒温箱中,培养一定时间,平皿上长出的许多单个菌落(单一微生物的集落)经分别分离后即为各种纯种菌株,简称纯种,移种至试管斜面培养基上,置4℃冰箱备用。
筛选模型:根据不同的筛选目的,采用不同的筛选模型。如常规筛选菌种的方法是将土壤中分离所得的纯种,在含有琼脂培养基的平皿上培养后,用打孔器将菌块移至含有试验菌的琼脂培养基上,在适宜的温度下培养一定时间后取出,如在菌块的周围有透明的---圈,则表明此菌种具有产生抑制试验菌生长的菌种物质的能力。所得菌种经过摇瓶液体发酵,测定发酵液或菌丝体内菌种的含量,低温生物菌种,选出生产能力高的菌种。另一方面对所提取的菌种进行结构分析、药理试验及---试验等,确为有效者,即可作为生产菌种。又如筛选脂肪酶生产菌种的方法是将分离所得的霉菌涂布于含有牛脂的琼脂培养基上,恒温培养一定时间,如菌落周围出现透明圈的,则该菌具有分解脂肪的能力,进一步作摇瓶发酵测定酶活力,挑选产量高者作生产菌种的出发菌株。
将需要保藏的菌种,低温生物菌种,接种在适宜的斜面培养基上,菌丝长满斜面时,用---纸包扎棉塞或者硅胶塞,放置在4℃的冰箱中保藏,叫做斜面(菌种)低温保藏法。由于微生物的---活动未停止,试管内培养基易失水变干。因此,保藏时间较短,不适于长期保藏。每隔3~6个月应转管一次。草菇菌种不耐低温,需保藏在10~12℃之间。或在草菇菌落上灌注3~4毫升的防冻剂(10%的甘油)。当菌丝长满斜面后,在无菌条件下,用无菌橡皮塞代替棉塞,并用石蜡密封,即可在室温或冰箱中保藏。这种方法可防止杂菌污染,隔绝氧气,避免培养基干燥,使用方便。据测定,保藏3年的菌种生活力仍很旺盛。
菌种保藏有多种方法,其原理大多大同小异,主要是运用一些方式尽量降低生物体内的代谢,达到延长生命,低温生物菌种多少钱,减少变异的目的。通常采用的方法为低温、缺氧、干燥。
低温主要对菌种产生两方面的影响,首先,较低的温度可以减缓机体细胞的酶活,降低---,达到保藏菌种的目的。其次,低温同时会导致菌体诱发菌丝自溶机制,如果降温过程失误,同样会造成机体的机械损伤和溶质损伤。
微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。
低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。
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