筛选:工业发酵的有用菌种,低温生物菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛,挑选具有某种能力的有用菌种。
分离:首先是从土壤或腐生植物中收集含菌样品,用无菌水稀释后,涂布于置有适宜---、霉菌生长的琼脂培养基平皿上,并将其倒置于恒温箱中,培养一定时间,平皿上长出的许多单个菌落(单一微生物的集落)经分别分离后即为各种纯种菌株,简称纯种,移种至试管斜面培养基上,置4℃冰箱备用。
筛选模型:根据不同的筛选目的,采用不同的筛选模型。如常规筛选菌种的方法是将土壤中分离所得的纯种,在含有琼脂培养基的平皿上培养后,用打孔器将菌块移至含有试验菌的琼脂培养基上,低温生物菌种,在适宜的温度下培养一定时间后取出,如在菌块的周围有透明的---圈,则表明此菌种具有产生抑制试验菌生长的菌种物质的能力。所得菌种经过摇瓶液体发酵,测定发酵液或菌丝体内菌种的含量,选出生产能力高的菌种。另一方面对所提取的菌种进行结构分析、药理试验及---试验等,确为有效者,即可作为生产菌种。又如筛选脂肪酶生产菌种的方法是将分离所得的霉菌涂布于含有牛脂的琼脂培养基上,恒温培养一定时间,如菌落周围出现透明圈的,则该菌具有分解脂肪的能力,进一步作摇瓶发酵测定酶活力,挑选产量高者作生产菌种的出发菌株。
(一)培养基保存法
利用各种斜面和半固体培养基,加上石蜡油保存菌种,是一种简易的保存方法。
1.普通琼脂斜面保存法:肠道菌、等一般---可接种于不含糖的普通琼脂斜面上,斜面底部应加少许无糖肉膏汤,以防干涸。经35℃培养18~24h后,移种于4℃冰箱中,一般可保存一个月,每月传代一次。
2.---琼脂斜面保存法:链球菌、应接种于---琼脂斜面上,35℃培养生长后,置4℃冰箱中保存,链球菌须半个月至1个月移种一次,新分离菌株须2~4天移种一次,以后逐渐延长移种时间,在适应后可延至半个月移种一次。
3.巧克力色斜面保存法:宜保存菌,并在35℃孵箱中保存,一般每2天移种一次。
4.鸡蛋斜面保存法:适于保存含有vi抗原的沙门菌属及其他含表面抗原的---,一般可保存一个月。
5.半固体穿刺保存法:将---接种于琼脂半固体或琼脂半固体内,经35℃培养18~24h,再以无菌方法加入灭菌的液体石蜡。高度约lcm,置4℃冰箱保存。保存时间可达3~6个月。
(二)干燥保存法
原理是将---体内的水分蒸发掉,使其处于休眠和代谢停滞状态,从而达到长期保存菌种的目的医|学教|育网搜集整理。菌种干燥后低温保存,可保存数年至十几年。
(三)冷冻干燥保存法
本法又称冷冻真空干燥法。它综合利用了各种有利于菌种保存的因素(低温、干燥和缺氧等),是目前有效的菌种保存方法之一。用本法保存的菌种具有成活率高,变---小等优点,保存期一般3~5年,低温生物菌种公司,有的可长达10年以上。
(四)脱脂牛奶保存法
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从18年开始,就对北京顺义马坡工业区污水厂(日处理2000吨))进行微生物改良,经菌种改良后,马坡污水厂各项出水指标均低于北京排放标准,一直平稳运行,被顺义局评为污水站。18年又连续对河北承德日处理5万吨的污水厂和辽宁长岭县日处理2万吨的污水厂进行微生物改良,都取得了---的改良效果,冬季低温氨氮指标一直持续稳定达标,平稳运行,没有二次再补充过耐低温生物菌种。
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